Исследование позволяет дифференцировать клетки костного мозга по фазам синтеза ДНК (стадии Gl, S, G2+m). Большинство клеток костного мозга делятся через разные промежутки времени. Отрезок времени между концом одного митоза и концом следующего называется клеточным циклом. Весь цикл распадается на две части: процесс деления (митоз) и подготовка к нему (интерфаза). Удвоение ДНК происходит в интерфазе, причем начинается задолго до митоза и заканчивается также до его начала. Период синтеза ДНК называется
S-периодом; промежуток между окончанием митоза и началом S-периода называется Gl-ne- риодом, промежуток между окончанием S-периода и началом митоза — С2-периодом. В интерфазы происходит удвоение не только ДНК, но и всей массы клетки. Рост клетки идет в течение всех периодов интерфазы, но особенно быстро — во второй ее половине — в S- и 02-периодах. В это время очень интенсивно синтезируются РНК и белок. К началу митоза синтетические процессы замирают и возобновляются в следующей интерфазе.
Таблица 7.39. Параметры клеточного цикла мнелокарноцнтов при различной патологии
[Шмарой Д.А., 1997]
Большинство специализированных клеток костного мозга либо не делятся совсем, либо делятся чрезвычайно редко и не находятся в митотическом цикле. Теоретически выход клеток из митотического цикла возможен в любой период интерфазы (Gl, S и G2), но практически абсолютное большинство выходят из стадии G1. Выход из цикла может быть обратимым (под воздействием каких-то факторов клетка может приступить к синтезу ДНК и разделиться, например, лимфоциты периферической крови входят в цикл и делятся под воздействием ФГА) или необратимым (гранулоциты крови при гемобластозах). Клетки костного мозга, которые находятся в митотическом цикле, могут проходить его с различной скоростью. Быстрее всего его проходят клетки-предшественницы зрелых форм (у морфологически недифференцируемых клеток-предшественниц гемопоэза цикл составляет около 8 ч). Определение содержания ДНК в каждой клетке клеточной суспензии позволяет получить распределение клеток по различным фазам клеточного цикла.
Анализ клеток костного мозга проводят с использованием ДНК-специфических красителей, возбуждающихся в ультрафиолетовой области. Выявление самых незначительных различий во флюоресценции позволяет идентифицировать анеуплоидные, а также активно пролиферирующие клетки. По соотношению делящихся и специализированных клеток в костном мозге можно судить о состоянии костного мозга, а у больных с гемобластозами заблаговременно предсказывать развитие бластного криза. Изучение митотического цикла клеток костного мозга по содержанию ДНК позволяет выявлять клетки метастатических новообразований, диагностировать и следить за течением гемобластозов, оценивать функциональное состояние костного мозга. Наиболее оптимальную информацию о состоянии костного мозга можно получить при одновременном анализе содержания ДНК в клетках костного мозга и определении антигенов на оболочке этих клеток с помощью моноклональных антител к различным антигенам, экспрессируемым той или иной популяцией клеток костного мозга. Параметры клеточного цикла миелокариоцитов при различной патологии представлены в табл. 7.39.
Анализ цикла клеток костного мозга с целью выявления ДНК проводят для диагностики властных кризов при лимфопролиферативных заболеваниях, дифференциальной диагностики анемий, а также для выявления патологии созревания и дифференцировки клеток костного мозга.
S-периодом; промежуток между окончанием митоза и началом S-периода называется Gl-ne- риодом, промежуток между окончанием S-периода и началом митоза — С2-периодом. В интерфазы происходит удвоение не только ДНК, но и всей массы клетки. Рост клетки идет в течение всех периодов интерфазы, но особенно быстро — во второй ее половине — в S- и 02-периодах. В это время очень интенсивно синтезируются РНК и белок. К началу митоза синтетические процессы замирают и возобновляются в следующей интерфазе.
Таблица 7.39. Параметры клеточного цикла мнелокарноцнтов при различной патологии
[Шмарой Д.А., 1997]
Заболевания |
S-фаза, % |
G2+m, % |
G1/0, % |
S+G+m, % |
S/(G2+m), % |
Здоровые |
12,3±0,3 |
3,8+0,17 |
83,9+0,4 |
16,2+0,4 |
3,34+0,15 |
Лейкозы (дебют или рецидив): |
|
|
|
|
|
• острый миелобластный лейкоз, |
10,6±0,7 |
2,55+0,40 |
85,2+1,4 |
14,5+1,46 |
4,45+0,41 |
• острый лимфобластный лейкоз, |
15,7±1,5 |
4,0±0,46 |
80,3+1,8 |
19,7+1,8 |
4,73+0,45 |
« лимфосаркома с лейкемизацией, |
14,9±1,44 |
2,89±0,35 |
82,4+1,5 |
17,8+1,6 |
6,62+1,15 |
• бластный криз хронического миелолейкоза |
14,7±|,54 |
3,2810,38 |
81,8+1,63 |
18,0+1,58 |
5,0+0,81 |
Лейкозы, ремиссия: |
|
|
|
|
|
• острый миелобластный лейкоз, |
15,6±1,06 |
4,20+0,36 |
80,0+1,32 |
19,8+1,38 |
4,0+0,25 |
• острый лимфобластный лейкоз, |
!5,2±0,95 |
4,83+0,53 |
79,8+1,22 |
20,2+1,25 |
3,88+0,27 |
• лимфосаркома с лейкемизацией, |
14,5±1,15 |
5,24+1,52 |
80,1+2,0 |
19,8+2,0 |
4,0+0,51 |
• хронический миелолейкоз |
12,4±1,38 |
3,72+0,64 |
83,8+1,86 |
16,2+1,86 |
3,71+0,59 |
Анемии: |
|
|
|
|
|
• железодефицитная, |
12,7±0,6 |
3,76+0,29 |
83,6+0,9 |
16,4+0,7 |
3,37+0,50 |
• пернициозная, |
36,1±3,0 |
6,28+0,94 |
57,6+2,6 |
42,3+2.6 |
7,40+1,73 |
• аутоиммунная гемолитическая, |
20,4±1,4 |
5,95+0,49 |
73,7+1,87 |
26,3+1,9 |
3.50+0,20 |
+ апластическая |
7,63±1,2 |
1,98+0,36 |
90,4+0,36 |
9,6+1,4 |
4,22+0,56 |
Большинство специализированных клеток костного мозга либо не делятся совсем, либо делятся чрезвычайно редко и не находятся в митотическом цикле. Теоретически выход клеток из митотического цикла возможен в любой период интерфазы (Gl, S и G2), но практически абсолютное большинство выходят из стадии G1. Выход из цикла может быть обратимым (под воздействием каких-то факторов клетка может приступить к синтезу ДНК и разделиться, например, лимфоциты периферической крови входят в цикл и делятся под воздействием ФГА) или необратимым (гранулоциты крови при гемобластозах). Клетки костного мозга, которые находятся в митотическом цикле, могут проходить его с различной скоростью. Быстрее всего его проходят клетки-предшественницы зрелых форм (у морфологически недифференцируемых клеток-предшественниц гемопоэза цикл составляет около 8 ч). Определение содержания ДНК в каждой клетке клеточной суспензии позволяет получить распределение клеток по различным фазам клеточного цикла.
Анализ клеток костного мозга проводят с использованием ДНК-специфических красителей, возбуждающихся в ультрафиолетовой области. Выявление самых незначительных различий во флюоресценции позволяет идентифицировать анеуплоидные, а также активно пролиферирующие клетки. По соотношению делящихся и специализированных клеток в костном мозге можно судить о состоянии костного мозга, а у больных с гемобластозами заблаговременно предсказывать развитие бластного криза. Изучение митотического цикла клеток костного мозга по содержанию ДНК позволяет выявлять клетки метастатических новообразований, диагностировать и следить за течением гемобластозов, оценивать функциональное состояние костного мозга. Наиболее оптимальную информацию о состоянии костного мозга можно получить при одновременном анализе содержания ДНК в клетках костного мозга и определении антигенов на оболочке этих клеток с помощью моноклональных антител к различным антигенам, экспрессируемым той или иной популяцией клеток костного мозга. Параметры клеточного цикла миелокариоцитов при различной патологии представлены в табл. 7.39.
Анализ цикла клеток костного мозга с целью выявления ДНК проводят для диагностики властных кризов при лимфопролиферативных заболеваниях, дифференциальной диагностики анемий, а также для выявления патологии созревания и дифференцировки клеток костного мозга.