ИРТ поражает преимущественно молодняк в крупных хозяйствах и характеризуется в основном острым воспалением верхних дыхательных путей и наружных половых органов. ИРТ проявляется в субклинической, легко и тяжело протекающих формах. Заболеваемость может достигать 100%, а смертность — 10%, особенно в период комплектования стад [47, 124]. Заболевание может распространяться при искусственном осеменении инфицированной спермой [46, 1700]. Иногда наблюдают поражение (обычно у телят) центральной нервной системы. Штаммы, выделенные от телят и обладающие нейропатогенными свойствами, вероятно, представляют собой антигенный вариант вируса. Заболевание может протекать в виде ринотрахеита или пустулёзного вульвовагинита. Две формы течения заболевания вызываются разными подтипами (1 и 2) одного вируса и, по- видимому, связаны с различиями их органного тропизма. Может быть, поэтому обе эти формы не встречаются одновременно в одном и том же хозяйстве [195]. Подтипы 1 и 2 герпесвируса крупного рогатого скота типа 1, вызывающие соответственно поражения респираторного тракта (инфекционный ринотрахеит) и гениталий (инфекционный вульвовагинит), не различаются по биологическим и серологическим свойствам, но их можно различить методом рестрикционного анализа генома. Циркуляция среди овец и коз вируса, близкородственного ГВ крупного рогатого скота типа 1, свидетельствует о том, что овцы и козы, вероятно, могут быть естественными хозяевами этого вируса. Во время температурных пиков животные быстро худеют, у лактирующих — резко снижается удой, у стельных коров часто наблюдают аборты. Вторичные инфекции усугубляют течение болезни. После острого периода болезни вирус длительное время сохраняется в организме без каких-либо клинических признаков.
Вирус обычно персистирует в региональных ганглиях в виде ДНК-копий. Факторами, способствующими переходу латентной инфекции в острую, могут быть стрессы различной природы, отелы, а в некоторых случаях неправильно проведенная вакцинация животных живой вакциной. Транспортировка животных после вакцинации может приводить к реактивации вакцинального вируса, по-видимому, вследствие повышения концентрации кортикостероидов в крови. Серонегативность при ИРТ не обязательно свидетельствует об отсутствии виру- соносительства.
В состоянии латенции подавляется генетическая экспрессия вируса. Развитие латенции и реактивация возбудителя регулируются иммунными и неиммунными механизмами. Активизация инфекции под действием дексаметазона происходит путем подавления иммунного механизма и прямого воздействия на ла- тентноинфицированные клетки.
Препарат способен реактивировать как «дикий», так и вакцинный штаммы. Реактивированные штаммы не отличаются от исходных. Реактивацию вируса ИРТ в эксперименте наблюдали спустя более 600 дней после инфицирования крупного рогатого скота [195, 215].
Переболевание сопровождается стойким и длительным иммунитетом, который может передаваться потомству с антителами молозива. Однако даже выраженный гуморальный иммунитет не предотвращает персистенции вируса. В случае реинфекции вновь происходит размножение и выделение вируса, хотя болезнь протекает без видимых клинических признаков. При возникновении повторного заболевания трудно бывает отличить реинфекцию от реактивации персистируюшего вируса. Всех животных, имеющих антитела к ГВ типа 1 крупного рогатого скота, следует считать носителями вируса, находящегося в состоянии латенции.
Слизистые оболочки респираторного и генитального трактов больных животных продуцируют IgA и интерферон [986]. Антитела в сочетании с комплементом ограничивают, но не исключают распространение герпесвируса в организме. Взаимодействие антител с клетками иммунной системы является более эффективным механизмом ограничения инфекции. Наиболее важными эффекторными клетками в антителозависимой цитотоксичности являются полиморфноядерные нейтрофилы, которые при наличии комплемента проявляют активность в отсутствие специфических антител. В подавлении инфекции клеточный иммунитет при ИРТ более эффективный, чем гуморальный, и в основном связан с Т-лимфо- цитами и макрофагами, хотя и те и другие могут поражаться вирусом.
В качестве средств специфической профилактики ИРТ в различных странах применяют живые и инактивированные вакцины. Однако в большинстве стран применяют в основном живые вакцины из аттенуированных штаммов вируса [47, 93]. Созданы живые маркированные вакцины на основе рекомбинантной ДНК, из которой удалены ген тимидинкиназы и другие гликопротеиновые «маркерные» гены. Вакцинация против ИРТ не предотвращает инфицирования, но зато снижает частоту возникновения (проявления) и тяжесть заболевания. Полевой вирус в организме таких животных размножается менее активно, и продолжительность его выделения короче [215].
Традиционные живые вакцины при ИРТ отличаются большим разнообразием. Например, в США применяют несколько живых вакцин. Большинство из них — штаммы вируса, аттенуированные длительным пассированием в первичных культурах или постоянных линиях клеток. При вакцинации живыми вакцинами необходимо использовать такие вакцинные штаммы, которые неспособны к персистенции, ибо не исключается возможность возникновения рекомбинантных вариантов при взаимодействии аттенуированного и вирулентного штаммов вируса. Имеются вакцины, полученные другим способом. Бельгийская вакцина представляет собой ts-мутант, который при 30°С размножается лучше, чем при 37°С, даже после реизоляции. Иными словами, вакцинный штамм обладает «маркером», отличающим его от полевого вируса. Подобный термочувствитель
ный мутант получен в Японии. Он сохранял свойства аттенуированного штамма после пяти пассажей на крупном рогатом скоте [195, 215].
В качестве живой вакцины предложен дефектный по тимидинкиназе (ТК-) мутант. Интраназальное и внутримышечное введение вакцины телятам не вызывало развития у них признаков болезни, но способствовало образованию нейтрализующих антител и устойчивости к последующему интраназальному заражению вирулентным штаммом вируса, снижало его репродукцию в слизистой носа. Вакцинный (ТК-) штамм способен персистировать в организме привитых телят не менее 3 мес. и передаваться телятам при контакте без перехода в ТК+ генотип.
Персистенция и экскреция аттенуированного штамма вируса обнаружена также при применении других живых вакцин. Особенно часто и длительно вакцинный штамм вируса выделяется с семенной жидкостью привитых быков. Введение живой вакцины во время эстрального периода может сопровождаться поражением яичников [995], а вакцинация в ранний период стельности — к прерыванию беременности [1072].
Считается, что интраназальная вакцинация более эффективна, чем подкожная или внутримышечная. Повторное введение вакцины усиливает иммунитет. Имеется ряд сообщений об успешном применении комбинированных вакцин против 2—4 возбудителей. В состав таких вакцин, кроме аттенуированного штамма вируса ИРТ, чаще всего входят аттенуированные штаммы вирусов парагриппа-3 и вирусной диареи крупного рогатого скота. Имеются данные, свидетельствующие об активизации носительства и выделении вируса ИРТ (вакцинного и полевого штаммов) у телят после заражения вирусом парагриппа-3 [195].
При интраназальном введении вакцинный вирус быстро проникает в клетки верхних дыхательных путей и глоточного кольца. Размножаясь в указанных клетках, вирус может выделяться во внешнюю среду в течение двух недель. После парентерального введения вакцинный вирус из секретов выделяется не всегда и с трудом.
Преимущество интраназальной вакцинации состоит в том, что при этом усиливается синтез IgA и локальное образование интерферона. Считается, что сухая вакцина для парентерального или интраназального применения должна содержать соответственно 105 и 104 ТЦД50/мл. Наряду с живыми вакцинами применяют инактивированные, обладающие рядом преимуществ, хотя их изготовление связано с дополнительными затратами. Инактивированные вакцины так же, как и живые, применяют двукратно с 2—3-недельным интервалом. Они могут существовать в виде моно- и комбинированных препаратов. Эффективность инактивированных вакцин против ИРТ зависит от ряда факторов, и прежде всего от концентрации протективных адъювантов.
Различные способы инактивации вируса оказывали неодинаковое влияние на антигенные детерминанты — мишени вируснейтрализующих антител. По степени разрушения антигенных детерминант инактиваторы располагались следующим образом: ультрафиолетовое облучение, нагревание (56°С), (3-пропиолак- тон и формальдегид. Согласно этим данным последнему должно отдаваться
предпочтение при изготовлении инактивированной вакцины [946]. С целью повышения иммуногенности вакцины вирусные антигены концентрировали поли- этиленгликолем.
Инактивированная формолвакцина с масляным адъювантом из вируса ИРТ с исходным титром 108 ТЦД50/мл после двукратного введения в дозе 2 мл с 4-недельным интервалом индуцировала у телят выраженный иммунитет независимо от предшествующего иммунного фона. У телят, перенесших спонтанную инфекцию с низким титром сывороточных и отсутствием секреторных антител, после вакцинации формировались гуморальные (1:128 - 1:256) и секреторные (1:2—1:8) антитела. Наблюдалась корреляция между уровнем сывороточных антител и устойчивостью телят к заражению. Иммуносупрессия дексаметазоном показала, что вакцинация серонегативных телят не предупреждала от инфицирования и последующей латенции вируса.
В неблагополучном по ИРТ хозяйстве применяли вакцину с масляным адъювантом и ГОА. Сероконверсия наблюдалась уже после первого введения вакцины. Титр колостральных антител в сыворотке крови 6—8-дневных телят от привитых матерей был высоким. В стадах, где клиническая картина ИРТ была стертой, в сыворотке крови телят от привитых матерей титр антител составил 1:76 (у контрольных животных 1:13). Колостральный иммунитет длился 4—5 мес. Вакцинация телят вызывала сероконверсию лишь тогда, когда уровень материнских антител у них был очень низким [361].
Инактивированные вакцины против ИРТ [76] и против ИРТ и ПГ-3 [89] оказались эффективными при испытании в производственных условиях. Вакцинальный иммунитет у телят развивался, несмотря на высокий уровень колостральных антител [89]. Иммуногенность субъединичной и инактивированной вакцин с масляным адъювантом оказалась сходной. Титр гуморальных антител у крупного рогатого скота после однократного и двукратного применения субъединичной вакцины был выше, чем при вакцинации инактивированной вакциной. Секреторные антитела формировались лишь после двукратной вакцинации и были равнозначными у животных, привитых обоими препаратами. Через 14 дней после второй прививки телята были устойчивы к интраназальному заражению вирулентным штаммом вируса ИРТ. Интенсивность размножения и продолжительность экскреции вирулентного штамма у животных, вакцинированных обеими вакцинами, были сходными. Иммунизированные телята выделяли меньше вируса и менее продолжительное время, чем непривитые.
Считают, что двукратное введение инактивированной вакцины сообщает привитым животным иммунитет продолжительностью 2 года [195]. Имеется хороший опыт сочетанного применения живой и инактивированной вакцины ИРТ и ФРГ. Живую вакцину вводили двукратно с интервалом в 6 недель сразу после установления диагноза. Спустя 7 мес. двукратно с тем же интервалом вводили инактивированную вакцину. В результате такой вакцинопрофилактики новые случаи заболевания не регистрировали. Спустя четыре года после прекращения вакцинации животные оказались серонегативными, за исключением неко
торых телят, имевших материнские антитела перед вакцинацией. Авторы оценивают предложенную схему применения живой и инактивированной вакцины как эффективную для оздоровления поголовья [370]. Комбинированная инактивированная вакцина, включающая высокоактивные антигены вирусов ИРТ, вирусной диареи и парагриппа-3, оказалась эффективным средством профилактики массовых патологических состояний, в том числе связанных с транспортировкой скота.
Испытание иммуногенности маркированной делеционной (gE") вакцины против ГВ-1 КРС на телятах показало, что внутримышечная или назальная иммунизация полностью не защищают от латентного инфицирования вирулентным штаммом гомологичности вируса [1001, 1393]. Инактивированная маркированная вакцина против ИРТ из негативного по гликопротеину Е штамма позволяла дифференцировать вакцинированных и инфицированных животных. Иммуногенность вакцины зависела от концентрации вирусного антигена [1403].
Поскольку вирус ИРТ может приживляться и длительно персистировать в организме вакцинированных животных, трудно однозначно ответить на вопрос о значении специфической профилактики в оздоровлении хозяйств от ИРТ, или точнее: можно ли путем систематического применения вакцин освободить хозяйство от носительства полевых штаммов вируса. Однако имеется сообщение о том, что полного оздоровления можно достичь в результате систематического (четырехлетнего) применения в хозяйстве инактивированной эмульгированной вакцины.
Таким образом, существующие средства вакцинопрофилактики защищают крупный рогатый скот от инфекционного ринотрахеита, но не от заражения полевым вирусом, установления его латенции и последующей реактивации, реэкскреции. Однако живые вакцины при интраназально-внутримышечном применении обусловливают хороший локальный иммунитет и защиту животных от клинического проявления инфекции. Инактивированные высокоантигенные вакцины после повторного введения также индуцируют локальный иммунитет и предотвращают распространение вируса. Перспективным является разработка высокоэффективных рекомбинантных субъединичных вакцин, основанных главным образом на иммуногенности одного из главных гликопротеинов оболочки вириона, особенно гликопротеина Д. Этот гликопротеин может быть экспрессирован в бакуловирусной системе или включен в геном векторного вируса и использован в качестве живой вакцины.
Многие европейские страны для искоренения болезни используют интегрированную программу, включающую иммунизацию маркированными вакцинами, выявление и убой всех животных, имеющих антитела на полевой вирус.