Клетки ворсинчатого хориона (плаценты), доступные для ПД, имеют различное происхождение:
- клетки цитотрофобласта (дифференцируются на стадии морулы);
- клетки мезенхимы (дифференцируются на стадии бластоцисты).
Для хромосомного анализа по клеткам хориона или плаценты
используют два основных метода.
- Длительное культивирование: растущие в монослое первичные культуры имеют гетерогенный клеточный состав с преимущественным ростом фибробластоподобных клеток мезенхимальной стромы ворсин. Образование колоний или рыхлого монослоя происходит обычно к 1012 дню культивирования. Основными недостатками метода являются длительность культивирования и контаминация культур материнскими клетками.
- «Прямые» препараты. Метод анализа «прямых» препаратов базируется на исследовании спонтанно делящихся клеток цитотрофо- бласта без их предварительного культивирования в сроки от 10 до 20 недель беременности.
Нами разработаны собственные модификации прямого метода — метод «стряхивания — отпечатывания» и ускоренный прямой метод, которые позволяют получать препараты из хориона/плаценты, удовлетворяющие всем критериям кариотипирования. В сочетании с флуоресцентными методами дифференциальной окраски хромосом результативность этих методов превышает 99 %.
Следует подчеркнуть, что эти модификации пригодны для приготовления препаратов хромосом из тканей с высокой естественной митотической активностью, включая любые ткани и органы зародыша. Интерфазные ядра, обработанные таким способом, вполне пригодны для метода FISH со специфическими ДНК-зондами, что важно при верификации цитогенетического пренатального диагноза.