Начальные этапы онтогенеза. Оплодотворение и имплантация яйцеклетки с иммунологической точки зрения представляют собой не всегда объяснимые процессы, так как речь идет о слиянии гистонесовмести- мых клеток при исключении каких-либо, реакций отторжения. В оплодотворенной яйцеклетке существует по крайней мере 3 группы антигенов: отцовские аллоантигены; эмбриональные антигены, появляющиеся лишь временно на определенных этапах развития зародыша; макромолекулярные продукты женских половых путей, приобретающие антигенность после контакта с семенной плазмой и сперматозоидами. В семенной плазме и на мембранах сперматозоидов имеется более 30 антигенов, в частности антигенов гистосовместимости 1-го и 2-го классов, антигенов групп крови АВО-резус и ряд других, чужеродных для женского организма. В половом тракте женщины имеется также развитая система местного иммунитета. Макрофаги, нейтрофи- лы, возможно, клетки-киллеры этой системы могут подвергать сперматозоиды фагоцитозу или уничтожать их. В секретах полового тракта IgG и IgA могут включать антиспермальные антитела и обусловливать агглютинацию сперматозоидов. Частота обнаружения таких антител у бесплодных женщин составляет около 10%. Низкие значения pH цервикальной слизи могут имитировать иммунологическую реакцию, вызывая иммобилизацию сперматозоидов. Способностью агглютинировать эти клетки обладают не только иммуноглобулины, но и бета- липопротеиды, содержащие стероиды (бета-спермоагглютинины). И все-таки элиминация сперматозоидов или нарушений имплантации, отторжения бластоцита не происходит по следующим причинам: 1) система местного иммунитета женского полового тракта не оказывает сильного противодействия поступлению мужских половых клеток; 2) системные реакции иммунитета (цитотоксические и цитолитические эффекты) не развиваются вследствие относительной изолированности женских половых путей от общего кровотока; 3) семенная жидкость содержит вещества, подавляющие иммунные процессы.
Иммунная система беременной женщины проявляет относительную толерантность к антигенам эмбриона и плода (т. е. к отцовским антигенам), благодаря чему плод не отторгается. Это объясняется наличием плацентарного барьера (трофобласта), обеспечивающего
изоляцию материнского и фетального кровотока и отличающегося низкой плотностью антигенов тканевой совместимости HLA на базальной мембране, а также индукцией избирательной иммунной суп* рессии материнских клеток против антигенов зародыша [Adinolfi М. et al., 1982). Плацента и плод синтезируют белковые факторы (альфа- фетопротеин, уромодулин, белковый фактор трофобласта) и небелковые соединения (эстрогены, АКТГ, кортизол, простагландин Е, прогестерон), подавляющие реакции отторжения. В крови беременных обнаружены также фактор, блокирующий лимфоциты и образование антител, ингибитор фактора, угнетающего миграцию макрофагов. Однако иммунобиологическая реактивность женского организма по отношению к бактериальным или вирусным антигенам во время беременности не снижается.
Первичным источником полипотентных (стволовых) клеток, способных дифференцироваться в гемо- и лимфопоэтические линии, является желточный мешок, из которого они, начиная с 6-й недели внутриутробной жизни, мигрируют в фетальную печень, вилочковую железу и костный мозг. Закладка тимуса — важнейшего органа иммунной системы происходит на 6—7-й неделе внутриутробного развития в области 3-го жаберного кармана в виде эпителиальной структуры с элементами мезенхимы, частично происходящими из неврального гребешка [Bockman D. Е., Kirby М. L., 1984]. На 7—8-й неделе тимус «заселяется» стволовыми клетками, происходящими из печени, и приобретает черты своеобразного лимфоэпителиального образования, которое мигрирует в средостение. У 14-недельного плода в тимусе уже отчетливо различаются два слоя: кора, содержащая большое количество лимфоцитов, и мозговая часть с относительно низким их содержанием. К концу 3-го месяца в мозговом слое железы появляются характерные образования — тельца Гассаля, на этом заканчивается ее формирование [Ивановская Т. Е., 1983].
В дальнейшем отмечаются лишь количественные изменения — увеличение коркового слоя до 12-й недели фетального периода. Функция железы чрезвычайно важна и на разных ступенях онтогенеза различна. На ранних стадиях тимус контролирует и направляет структурное и функциональное созревание иммунокомпетентной ткани, на более поздних — обеспечивает сохранность и целесообразность иммунологических реакций. Пока не совсем ясно, каким образом тимус осуществляет «обучение» стволовых клеток функциям Т-лимфоцитов: путем ли пассажа клеток-предшественников через орган с последующим заселением периферических лимфоидных органов или посредством специальных гуморальных факторов, вырабатываемых в тимусе и достигающих костный мозг. В вилочковой железе лимфоциты дифференцируются на кортикальные и медуллярные, последние представляют собой иммунокомпетентные клетки-тимоциты, поступающие в кровоток. Иммунологические незрелые кортикальные тимоциты могут обнаруживаться и в крови. С помощью моноклональных антител в крови плода и новорожденных могут выявляться эти незрелые тимоциты,
несущие антигены дифференцировки CD1 (Т16), а также CD2, Т10 и Т11. Кортикальные тимоциты не имеют общего маркера Т-клеток CD3 и лишены антигенов HLA. Зрелые (медуллярные) тимоциты вилочко- вой железы, поступающие в кровь, имеют маркеры CD3, CD5, CD4, CD8 и антигены HLA 1-го и 2-го классов.
Дифференцировка кортикальных и медуллярных тимоцитов происходит до 14-й недели внутриутробного периода [Haynes В. F., 1984]. В эмбриональном периоде существуют особенности молекулярной структуры рецепторов Т-лимфоцитов — TCR (мембранные IgT). Они характеризуются пептидными гамма-бета-цепями, тогда как после рождения они состоят из альфа-бета-цепей [Брондз Б. Д., 1989]. Как известно, TCR осуществляют распознавание чужого антигена, ассоциированного с собственными антигенами тканевой совместимости HLA, и переключение синтеза Т-рецепторов определенно связано с возрастными изменениями иммунной реактивности. HLA-антигены появляются на клетках плода между 8-й и 9-й неделями внутриутробного развития.
Закладка селезенки начинается с 5-й недели. Начало функционирования костного мозга относят к 11—12-й неделе. В этот период он так же, как и селезенка, и лимфатические узлы, активно заселяется лимфоцитами. Однако в промежутке между 10-й и 16-й неделями самым значительным источником этих клеток продолжает оставаться печень плода, где их число превышает суммарное количество лимфоцитов, содержащихся в вилочковой железе, селезенке и костном мозге. Последний становится основным источником миелоцитов и эритробластов лишь к 8-му месяцу внутриутробного развития, после спада эритро- поэтической активности печени и селезенки.
Закладка лимфатических узлов начинается на 4-м месяце фетального периода, а формирование стромы и синусов лимфоцитов завершается лишь в постнатальный период. К 12-й неделе лимфоциты составляют 50% всех клеток. Морфологически к этому времени они весьма сходны с малыми лимфоцитами, встречающимися в крови взрослых людей.
Лимфоциты обнаруживаются в периферической крови эмбриона на 7—8-й неделе развития. Постепенно их количество увеличивается от 1000 клеток в 1 мкл на 12-й неделе до 10 ООО — на 20—25-й неделе, при этом они составляют 50% лейкоцитов крови. На 12—16-й неделе увеличивается популяция лимфоцитов в селезенке и лимфатических узлах.
Т-лимфоциты выявляются в тканях плода примерно на 40-й день гестационного возраста — сначала в печени и костном мозге, затем в тимусе и селезенке, что было доказано с помощью метода образования розеток с эритроцитами барана. При исследовании пуповинной крови выяснилось, что число розеткообразующих клеток в раннем онтогенезе достоверно ниже, чем количество Т-лимфоцитов, определяемое моноклональными антителами по сумме CD4- и СБ8-клеток [Solinger А. М., 1985]. .
Спонтанная реакция бластной трансформации регистрируется на 33-й неделе, а ФГА-индуцированная значительно раньше, на 10-й неделе. Т-лимфоциты плода могут отвечать на антигены, по отношению к которым сенсибилизированы материнские клетки, хотя у плода возможны и такие реакции, которые не проявляются лимфоцитами матери. Таким образом, фетальные лимфоциты способны подвергаться сенсибилизации. Фетальные тимоциты начинают реагировать на ми- тогенные воздействия (фитогемагглютинин) между 10-й и 12-й неделями гестации, т. е. уже через 2—3 нед после начала лимфопоэза. Лимфоциты крови плода реагируют на митогены на 2—3 нед позднее по сравнению с тимоцитами. Распознавание клеток в смешанной культуре лимфоцитов становится возможным после 12-й недели (тимоциты) или на 14—15-й неделе (селезенка) [Lawton R., Cooper М. D., 1989]. Становление этой реакции связано с появлением антигенов тканевой совместимости на мембранах лимфоцитов.
Т-клетки распознают чужеродные антигены только при условии их ассоциации с антигенами гистосовместимости. При этом хелперы CDA осуществляют такое распознавание через антигены HLA 2-го класса (HLA—DR, DQ, DP), а супрессоры — через антигены HLA 1-го класса (HLA—А, В, С). Антигены тканевой совместимости выявляются на тимоцитах плода на 14-й неделе внутриутробной жизни. В этот же период становятся возможными цитотоксические реакции, что позволяет связывать этот факт с экспрессией антигенов HLA, хотя лишь небольшое количество клеток плода несет эти антигены [Rayo С. et al., 1987]. Способность развивать реакции отторжения трансплантата обнаруживается у плода на 16-й неделе внутриутробного развития.
Естественные киллеры (гранулярные лимфоциты, не имеющие маркеров Т- или В-клеток) появляются у плода на 9-й неделе гестации [Abo Т. et al., 1983]. Однако имеются основания считать, что их функция во внутриутробном периоде низка и недостаточна для элиминации клеток организма, инфицированных вирусами или микробами. Такими же характеристиками отличаются цитотоксические Т-лимфоциты. В пуповинной крови их активность не превышает 50% активности клеток взрослых.
В-клетки и степень их зрелости определяются по наличию на мембране иммуноглобулинов и рецепторов к их Fc-фрагментам, к комплементу CR, а также к поликлональным В-активаторам (липополи- сахариду, липопротеину и др.). Показано, что на ранних стадиях онтогенеза первым на мембране В-лимфоцитов появляется IgM [Rosenberg Y. I., Parish С. R., 1977], далее его плотность уменьшается и начинает выявляться IgD, затем и IgG, IgA, IgE. Человеческие эмбрионы уже на 15-й неделе обнаруживают зрелый характер экспрессии IgG на В-клетках [Gathings W. Е. et al., 1981]. Рецепторы Fc и CR (комплементарные) появляются несколько позднее.
В крови плода зрелые В-лимфоциты выявляются на 12—15-й неделе. Способность к образованию плазматических клеток и продукции антител обнаруживается с 10—12-й недели беременности. Содержание
IgG в крови до 17-й недели беременности составляет в среднем 0,1 г/л, к 32-й неделе беременности повышается до 0,4 г/л, а у новорожденных составляет 1 г/л [Miller М. Е., 1986]. Однако у доношенных высокий уровень IgG достигается не за счет их синтеза, а в результате активного транспорта через плаценту в самые последние недели беременности.
Трансплацентарная передача материнских антител — процесс активный и связана со способностью плацентарных клеток поглощать белковые молекулы и осуществлять перенос их без деградации. В экспериметальных исследованиях показано, что транспорт белков через плаценту опосредован рецепторным механизмом. При этом интенсивность передачи регулируется концентрацией белка. При высоких концентрациях IgG в сыворотке крови матери транспорт замедляется, при низких усиливается. Этот механизм имеет большой биологический смысл, поскольку поддерживает относительно устойчивый уровень данного белка в крови плода. Он также хорошо объясняет селективный характер мембранного транспорта лишь одного изотипа иммуноглобулина (IgG) при отсутствии такого механизма переноса для других иммуноглобулинов (IgA, IgD, IgE), имеющих примерно такие же физические параметры (величина молекулы, ее форма и др.). Не объяснен ограниченный транспорт IgG2 через плаценту, хотя субклассы 1,3,4 переходят активно [Schur Р., 1973].
Основатель рецепторной концепции трансмембранного перехода IgG от матери к плоду F. W. Brombel (1970) так представляет себе этот процесс: молекула IgG связывается с рецептором к Fc-фрагменту на поверхности клетки трофобласта и подвергается пиноцитозу, затем поступает в кровоток плода.
Иммунная система плода при его контакте с чужеродными антигенами отвечает увеличением синтеза IgM. Повышение концентрации IgM в пуповинной крови более 200—300 мг/л свидетельствует об антигенной стимуляции плода или о внутриутробном инфицировании.
Антитела, относящиеся к классу IgM, через плаценту не переходят, что объясняет недостаточную защищенность новорожденного против грамотрицательных микробов (кишечная палочка, сальмонеллы). Согласно данным, приводимым М. Е. Miller (1989), менее 40% новорожденных защищены от кишечной палочки и только 20% от сальмонелл.
Иммуноглобулины А и Е также не поступают от матери. Синтез IgA плодом начинается на 13—14-й неделе, однако уровень его в крови остается вплоть до рождения ребенка чрезвычайно низким. При отсутствии внутриутробной антигенной стимуляции интенсивность синтеза иммуноглобулинов плодом очень низка и соответственно невысок их уровень в сыворотке крови даже к моменту рождения: IgM 160—180 мг/л, a IgA — за пределами чувствительности метода радиальной иммунодиффузии.
Среди систем гуморальной антибактериальной защиты плода определенное значение придается околоплодным водам. В них обнаружены лизоцим, бета-лизин, трансферрин, иммуноглобулины. Околоплодные воды в подавляющем большинстве случаев стерильны. В тех
Таблица 5. Уровни отдельных классов иммуноглобулинов в околоплодных водах, сыворотке крови роженицы и новорожденного (М ± с, г/л)

Исследуемый материал	IgA	IgM	IgG
Сыворотка крови матери	1,590 ±0,302	1,24610,184	10,760 + 0,874
Околоплодные воды	0,028 ± 0,006	0	0,266 ±0,122
Сыворотка крови плода	0.	0,0465 ±0,013	11,826 ± 0,968

же случаях, когда высевалась какая-либо микрофлора, как правило, обнаруживались те или иные проявления инфекции. Не удалось доказать существования в околоплодных водах фактора, тормозящего рост стафилококков, стрептококков, дифтероидов, кишечной палочки, лактобактерий.
Результаты исследований спектра антител весьма разноречивы. Р. М. Страух (1967) обнаруживал появление стафилококкового антитоксина в околоплодных водах после иммунизации беременных женщин. Наличие антител в амниотической жидкости можно рассматривать как косвенное доказательство происхождения хотя бы части белков околоплодных вод из материнского организма.
По данным К. Н. Прозоровской (1977), иммуноглобулины в околоплодных водах представлены в основном классом G и незначительным количеством IgA (табл. 5).
При пересчете количества IgA и IgG на общее содержание белка оказалось, что относительная концентрация их в околоплодных водах соответственно в 5 и 3 раза меньше, чем в сыворотке крови женщины. IgM не был обнаружен ни в одном из образцов околоплодных вод здоровых женщин.
При определении IgA в околоплодных водах с помощью сыворотки анти-SC (против «секреторного» компонента), приготовленной в МНИИ педиатрии и детской хирургии Министерства здравоохранения и медицинской промышленности РФ, оказалось, что именно эта секреторная форма IgA (SIgA) присутствует в основном в околоплодных водах. Эти данные свидетельствуют о наличии в околоплодных водах интакт- ного секреторного IgA и, возможно, некоторого количества свободного SC. Вопрос о происхождении секреторного IgA в околоплодных водах весьма принципиален, ибо они не относятся к внешним секретам. Первое и естественное предположение состоит в том, что источником секреторного IgA являются мочевыводящие пути плода. Однако при исследовании мочи у детей первых суток жизни на наличие секреторного IgA последний удалось обнаружить лишь в 2 случаях из 21. Более того, в околоплодных водах, полученных при амниоцентезе в достаточно ранние сроки беременности (28 нед), также был обнаружен секреторный IgA. Эти факты дают основание предполагать, что IgA или по крайней мере SC-фрагмент может синтезироваться в околоплодных оболочках плаценты. Обнаружение секреторного IgA может свидетельствовать об участии амниотической оболочки в секреции по
крайней мере «транспортного фрагмента» IgA, а значит, о ее определенной роли в формировании отдельных компонентов околоплодной жидкости.
У женщин с бактериальными (кишечными) и вирусными инфекциями в околоплодных водах обнаруживался IgM, хотя это были единичные случаи, но обнаружение его в околоплодных водах именно у инфицированных родильниц дает основание связать эти факты между собой. Различия в содержании IgM у больных и здоровых женщин статистически недостоверны.
Система комплемента. Становление важнейших функций комплемента (очищение крови от иммунных комплексов, литическое действие на клетки, нейтрализация вирусов, имунорегуляторное действие) происходит позднее, чем развитие Т- и В-лимфоцитов. Через плацентарный барьер белковые структуры комплемента не проникают, и плод не может получить их от матери.
Способность плода синтезировать белки системы комплемента доказывается следующими фактами: обнаружением его компонентов в культурах фетальных клеток; расхождениями фенотипов полиморфных компонентов у матери и плода (С2, СЗ, С4); идентификацией тех компонентов комплемента в крови плода, которые отсутствуют у матери (наследственный дефицит).
Белки системы комплемента не переходят через плацентарный барьер. Отдельные компоненты комплемента зарегистрированы в тканях плода уже на 6-й неделе внутриутробной жизни, в крови — на 10-й неделе [Gitlin D., 1975].
Одним из первых синтезируется ключевой компонент классического пути — СЗ; компоненты С2, С4, С5 синтезируются на 8-й неделе, С7 и С9 — на 16-й неделе. К 19-й неделе внутриутробной жизни кровь плода содержит все компоненты комплемента. Содержание компонентов СЗ и С4 в крови плода к моменту родов достигает 50—75% уровня, определяемого у матери. То же самое установлено в отношении гемолитической активности СН50 и содержания фактора В. Наряду с этим уровень компонентов мембраноатакующего комплекса С8 и С9 едва достигает у новорожденного 10% нормальных показателей такового у взрослых. Низкое содержание факторов СЗ и В крови новорожденных определяет недостаточную опсоническую активность плазмы, что служит одним из существенных условий чувствительности организма новорожденного по отношению к инфекции. Примерно к 3-му месяцу постнатальной жизни содержание основных компонентов классического пути активации комплемента достигает величин, определяемых у взрослых [Berger М., Frank М., 1989]. При развитии воспалительных процессов у новорожденных в защитные реакции включается альтернативный каскад реакций комплемента (не вовлекающий специфические антитела), а позднее активируется классический путь. Однако к моменту рождения система активации комплемента по альтернативному пути остается незрелой.
Изучение развития системы молекулярных медиаторов иммунного
ответа (интерферона, интерлейкинов, многочисленных факторов активации отдельных клеточных типов и клонов) фактически находится на начальных этапах, поэтому сведения об этих процессах крайне ограничены.
Y. I. Bryson и соавт. (1980) обнаружили продукцию гамма-интерферона макрофагами под влиянием вируса ньюкастлской болезни только у одного из 20 новорожденных, тогда как клетки всех обследованных взрослых реагировали на тот же вирус. Этот факт автор связывал с функциональной незрелостью макрофагов.
Исследования, проведенные НИИ эпидемиологии и микробиологии им. Н. Ф. Гамалеи и МНИИ педиатрии и детской хирургии М3 РФ[1], позволили получить новые данные о развитии системы интерферона у детей (В. В. Малиновская и др.). Установлено, что во внутриутробном периоде во всех тканях, плаценте, амниотической жидкости альфа-интерферон определяется в значительных количествах (до 10 ед/г ткани): эмбрион буквально пропитан альфа-интерфероном. Уровень такого эндогенного альфа-интерферона в крови значительно выше у новорожденных по сравнению с доношенными детьми. По-видимому, на ранних этапах онтогенеза функции системы интерферона направлены на регуляцию развития, а не на противоинфекционную защиту или на активацию естественных киллеров. Только способность клеток к продукции иммунного гамма-интерферона отражает противоинфекционную резистентность. В периоде новорожденности и грудного возраста продукция гамма-интерферона крайне ограничена. Переход с раннего на зрелый тип функционирования системы интерферона происходит после первого года жизни (до 3 лет), при этом уровень эндогенного интерферона снижается в 8,8 раза. Но и в этот период образование зрелого альфа- и гамма-интерферона существенно ниже, чем у взрослых.
Фагоцитирующие клетки (гранулоциты, моноциты, макрофаги). Во внутриутробном периоде гранулоциты появляются в печени плода на 2-м месяце беременности, а к 5-му месяцу главным их продуцентом становится костный мозг. Внутриутробные инфекции ведут к быстрому истощению пула нейтрофилов. В функциональном отношении гранулоциты плода (по данным исследований пуповинной крови и крови недоношенных) отличаются низким хемотаксисом, а также ограниченной способностью к адгеренции (прилипанию). Весьма недостаточны миграция и необходимая для нее деформобильность клетки, что обусловлено более жесткой, чем у взрослых, мембраной клеток [Miller М. Е., 1979]. Последнее обстоятельство связывается с повышенным содержанием насыщенных жирных кислот в мембранных липидах новорожденных и более низким количеством ненасыщенных жирных кислот, которые придают мембранам свойство текучести.
К концу беременности нейтрофилы способны генерировать токсические радикалы кислорода, т. е. генерировать дыхательный «взрыв» фагоцитов. Однако образуемый лейкоцитами супероксид-анион слабо
преобразуется в энергичные бактерицидные формы — перекись водорода, гидроксильный радикал, синглетный кислород. Цепные реакции перекисного окисления быстро угасают, а недостаточная реакция высвобождения лизосомных ферментов и катионных белков раскрывает причину незавершенности фагоцитоза.
Одной из принципиальных проблем внутриутробного развития иммунокомпетентной ткани и органов является вопрос о стимулах их развития. Тот факт, что развитие тимуса у плода, а также постоянное закономерное увеличение количества Т- и В-лимфоцитов в его крови и лимфоидных органах происходит при отсутствии внешней антигенной стимуляции, дает основание некоторым исследователям поставить под сомнение необходимость любой антигенной стимуляции для нормального развития и функционирования иммунной системы. Однако следует иметь в виду, что смена антигенно различающихся клеточных поколений и фетальных белковых компонентов в результате закономерно развивающейся дифференцировки и гистогенеза может служить особым антигенным стимулом для иммунокомпетентных клеток. По- видимому, развитие и становление иммунной системы — результат реализации генетической программы онтогенеза, для полноценного завершения которой необходима внешняя или внутренняя антигенная стимуляция.
Период новорожденности и критические периоды постнатального развития. Период новорожденности с точки зрения иммунологии имеет особое значение для формирования в последующем адекватного иммунного ответа. Именно в этот период развитие механизмов иммунитета (становление взаимосвязей) происходит наиболее стремительно и во многом определяет функционирование иммунной системы в дальнейшем. При этом за точку отсчета принимаются значения иммунологических параметров, полученных при исследовании пуповинной крови, которые представляют собой сумму компонентов иммунной системы, сформировавшихся к моменту рождения как собственных, так и полученных пассивно от материнского организма.
После рождения лимфоидная ткань ребенка получает мощный стимул для развития. На организм обрушивается поток антигенной стимуляции через кожу, дыхательные пути, желудочно-кишечный тракт, активно заселяемые микрофлорой уже в первые часы после рождения. И как результат такой стимуляции быстрыми темпами идет развитие лимфоидного аппарата организма: стремительное заселение лимфоцитами периферических лимфатических узлов (особенно брыжеечных и мезентериальных), увеличение их массы, интенсивное развитие центров размножения и рост числа глобулинопродуцирующих плазматических клеток. Зависимость формирования и развития лимфоидной системы организма после рождения от нормальной микрофлоры (в первую очередь кишечника) особенно убедительно продемонстрирована в опытах на безмикробных животных в стерильных изоляторах. Длительная изоляция в особо чистой замкнутой среде может вызвать обеднение кишечной микрофлоры до единичных видов.
В таких случаях при возвращении в обычную среду возможно возникновение так называемого микробного шока. Однако в особых случаях (при трансплантации органов и тканей, лечении аутоиммунных заболеваний, выхаживании детей с малой массой, иммунная система которых имеет крайне ограниченные адаптационные возможности) и при лечении врожденных иммунодефицитных состояний целесообразно резко уменьшить количество и видовой состав микрофлоры. В таких случаях применяются гнотобиологические изоляторы.
После рождения ребенка абсолютное число лимфоцитов в крови резко повышается уже на 1-й неделе жизни (первый перекрест в формуле белой крови). Физиологический лимфоцитоз сохраняется на протяжении 5—6 лет (по выражению М. С. Маслова, все дети — лимфатики). Число клеток, способных образовывать розетки с эритроцитами барана (Е-РОК), у новорожденных намного ниже, чем у взрослых. Содержание отдельных субпопуляций Т-лимфоцитов (хел- перы, супрессоры), по данным исследований с помощью моноклональных антител, достоверно не отличается от таковых соотношений у взрослых, однако у новорожденных обнаруживается несоответствие функциональных характеристик субпопуляций их фенотипу, определяемому моноклональными антителами против лимфоцитарных эпитопов взрослых.
Если судить о состоянии Т-системы к моменту рождения по наиболее простому и распространенному тесту — количеству клеток, имеющих рецепторы к бараньим эритроцитам и образующих розетки, то, согласно данным большинства исследований, процент таких клеток у детей снижен по сравнению со взрослыми, однако в связи с повышенным содержанием общего числа лимфоцитов в кровотоке абсолютное значение Т-лимфоцитов даже больше, чем у взрослых. По этому показателю нет оснований судить о слабости Т-системы иммунитета новорожденных.
У новорожденных снижены показатели реакции бластной трансформации (РБТЛ) Т-лимфоцитов под влиянием неспецифических митогенов (ФГА, КонА). В то же время их отличает достаточно высокая спонтанная РБТЛ [Михайлова 3. М. и др., 1981]. Способность Т-лимфоцитов к сенсибилизации с последующим ответом на стимуляцию по крайней мере не ниже таковой во сравнению с Т-лимфоцитами взрослых.
Абсолютное количество Т- и В-лимфоцитов у новорожденных значительно повышено (после 5-го дня жизни), хотя относительное их число (в процентах) не отличается от такового у взрослых [Самсы- гина Г. А. и др., 1985].
По данным А. В. Самохваловой (1987), у доношенных новорожденных на 1-й неделе жизни Т- и В- лимфоциты составляют: ОКТ-3 — 44,2 ±1,3%, ОКТ-4 —29,9 ± 1,1%, ОКТ-6 —0,88%, ОКТ-8 —14,8 + ± 0,93%, ОКТ-11 — 39,4 ±1,8%. У недоношенных 24—37 нед (на 1-й неделе жизни)—ОКТ-3 — 36,4 ± 2,4, ОКТ-4 — 27,5 ± 2,5, ОКТ-6 — 3,3 ± 0,7, ОКТ-8 — 12,0 ± 1,8, ОКТ-Ш — 5,2 ± 0,8, ОКТ-11 — 38,5 ± 2,2.
Согласно данным A. Durandy (1986), число циркулирующих Т-лим-
фоцитов в пуповинной крови меньше, чем у взрослых, хотя различия не столь существенны, как это было установлено исследованиями А. М. Solinger (1985).
По данным G. Poccardi и соавт. (1987), общее количество Т-лим- фоцитов в периферической крови при исследованиях с использованием моноклональных антител Leu у новорожденных даже выше, чем у взрослых, как в абсолютных, так и в относительных величинах. При этом соотношение лимфоцитов — хелперов (CD4) и супрессоров (CD8) увеличено вследствие количественного преобладания Т-хелперов. 15— 20% клеток имеют двойные эпитопы — и хелперов, и супрессоров. Авторы отметили очень низкое содержание в крови естественных киллеров (0,77%), тогда как у взрослых более 16%.
Преобладание Т-лимфоцитов хелперов в крови новорожденных при использовании моноклональных антител отмечено многими авторами. Это не увязывается с общей супрессорной направленностью реакций клеток иммунной системы, обнаруживаемой при функциональных исследованиях. Противоречие в расхождении фенотипов и функций Т-лимфоцитов новорожденных объясняется следующим образом.
Супрессорную функцию осуществляют не только клетки CD8, но и другие, в частности циркулирующие в крови незрелые тимоциты с маркерами CD1, CD10, CD11, а также естественные киллеры. Лимфоциты СВ4-хелперы включают активный субклон CD4/2H4, так называемые хелперы-индукторы супрессии. Выше отмечена возможность носительства клетками двойных эпитопов — хелперов и супрессоров (по крайней мере по моноклональным антителам Leu), что затрудняет точную количественную оценку соотношения функциональных субпопуляций Т-лимфоцитов. Наконец, В-лимфоциты новорожденных отличаются низкой чувствительностью к интерлейкинам, продуцируемым хелперами.
Р. К. Kotylo и соавт. (1990) показали, что среди хелперной популяции пуповинной крови индукторы супрессии CD4/2H4 или CD4/CD45 были преобладающей фракцией лимфоцитов (78%), тогда как клетки-хелперы, несущие маркеры CD4/4B4 (или. CD4/CDW29), составляли всего 9%. Хелперы-индукторы супрессии CD4/2H4 стимулируют функции Т-супрессоров и слабо реагируют на антигены. Субклон CD4/3B4, как известно, включает хелперы-индукторы, стимулирующие В-лимфоциты и способствующие формированию клеток, несущих иммунологическую память, но их мало у новорожденных [Anderson U. et al., 1983; De Paoli P. et al., 1988]. Некоторые лимфо- циты-супрессоры CD8 у новорожденных не имеют общего для Т-лимфоцитов эпитопа CD3, поэтому не выявляются при исследовании общего числа Т-лимфоцитов.
Биологический смысл общей супрессорной направленности реакций клеток иммунной системы (независимо от фенотипа клеток) состоит в предупреждении тяжелой (фатальной) иммунокомплексной патологии при контакте с огромным числом антигенов после рождения
и интенсивного развития субпопуляций лимфоцитов-хелперов, необходимого для начала синтеза собственных антител.
Выработка              интерлейкинов              (ИЛ)              активированными
лимфоцитами — одна из важнейших функций клеточного иммунитета. ИЛ обладают широким спектром воздействия на разные субпопуляции лимфоцитов, функции которых могут быть разобщены, а именно такая их «диссоциация» наблюдается у новорожденных. В ряде исследований установлено, что бластный ответ лимфоцитов новорожденных выше, чем у здоровых взрослых доноров, однако при этом надосадочная жидкость культур содержала меньше LT. Именно сниженная цитотоксичность считается характерной особенностью лимфоцитов новорожденных.
У новорожденных низка цитотоксическая активность Т-лимфоцитов и естественных киллеров (ЕК). Кожные пробы при постановке реакций ГЗТ ослаблены или отрицательны. Особенности регуляции межклеточного взаимодействия в иммунном ответе новорожденных связаны с ограниченной продукцией ИЛ и ИФН. У новорожденных ослаблены процессы активации системы комплемента и его альтернативного пути (дефицит фактора В и пропёрдина). Физиологический дефицит иммунного у-ИФН определяет слабую антивирусную защиту в первые недели жизни и недостаточную активность НК.
Число В-лимфоцитов в крови новорожденных превышает в 4—5 раз количества, определяемые у взрослых. Однако функциональная активность их резко ограничена. В-лимфоциты новорожденных (в отличие от таковых у детей после первого года жизни) не отвечают на специфический для них PWM пролиферацией и увеличением синтеза иммуноглобулинов [Schur P. Н. et al., 1979]. Синтез иммуноглобулинов осуществляет по крайней мере один В-лимфоцит из 5 циркулирующих. Гуморальный иммунитет новорожденного обеспечивается материнскими антителами, относящимися к классу IgG. Материнские антитела защищают организм новорожденного от полиовируса, вирусов кори, краснухи, от менингококков и стрептококков, возбудителей коклюша, столбняка, дифтерии.
В пуповинной крови обнаруживается большое число В-лимфоцитов, несущих на своих мембранах IgD, хотя свободный IgD в крови не определяется. Такие лимфоциты относятся к категории незрелых клеток, хотя они важны для формирования клонов В-лимфоцитов, продуцирующих IgG. Лимфоциты с IgD на мембранах исчезают из крови, когда становится возможной иммунологическая память.
Способность новорожденных реагировать на полисахаридные антигены (например, бактериальной мембраны) ограничена, и отчасти это объясняется низким уровнем субкласса IgG: в крови. Именно к этому классу относятся антитела против полисахаридных структур (например, против тейхоевой кислоты и др.).
Миграционная активность лейкоцитов, определяемая в исследованиях in vitro, снижена и достигает значений, сопоставимых с подвижностью лейкоцитов взрослых через 2—3 нед после рождения. Причина
сниженной миграционной (хемотаксической) функции заключается как в особенностях самих клеток, так и в пониженной способности новорожденных к образованию хемотаксических факторов. Что касается данных о подвижности лейкоцитов новорожденных, то методом «кожного окна» (единственной до сегодняшнего дня моделью изучения миграционной способности лейкоцитов у людей in vivo) показано, что задержка миграции в очаг воспаления в основном относится ко второй фазе миграции мононуклеаров. Наблюдаемая же большинством авторов сниженная поглотительная функция нейтрофилов объясняется не дефектом самой клетки, а недостатком опсонинов. Ведущая роль среди них принадлежит комплементу и IgG.
Сыворотка крови новорожденных отличается низкой опсонической активностью по отношению к штаммам кишечной палочки 022/Н16 и 015/Н7, которые у взрослых подвергаются опсонизации с участием компонентов альтернативного пути и в отсутствие антител. Низкая опсоническая активность крови новорожденных обнаружена по отношению к ряду антигенов — микробных, грибковых и др.
Содержание лизоцима в пуповинной крови выше, чем в сыворотке матерей, в течение первых 3 дней жизни количество его нарастает и превосходит его содержание в крови взрослых людей. К 7—8-му дню оно несколько снижается и достигает уровня такового у взрослых. В отличие от пуповинной крови содержание лизоцима в слезах новорожденного ниже, чем у взрослых!
В гранулах полинуклеаров содержится железосвязывающий белок — лактоферрин. Его концентрация в крови отражает активность нейтрофилов. Лактоферрин — один из важных факторов антибактериальной защиты. Рост многих микроорганизмов подавляется им вследствие конкурентного связывания железа. Некоторые авторы относят лактоферрин к белкам «острой фазы» воспаления. Почти у 50% новорожденных с бактериальными или вирусными инфекциями плазматический уровень лактоферрина достоверно повышен [Miller М. Е., 1989].
Неспецифические защитные функции выполняет в организме фиб- ронектин — высокомолекулярный гликопротеин с опсонической активностью. Растворимый плазматический фибронектин ранее был известен как глобулин, выпадающий в осадок на холоде. Нерастворимый — тканевый фибронектин — определяется в структурах соединительной ткани и базальных мембран.
М. С. Yoder и соавт. (1986) находили у новорожденных низкое содержание плазматического фибронектина, особенно у детей